- Stahuj zápisky z přednášek a ostatní studijní materiály
- Zapisuj si jen kvalitní vyučující (obsáhlá databáze referencí)
- Nastav si své předměty a buď stále v obraze
- Zapoj se svojí aktivitou do soutěže o ceny
- Založ si svůj profil, aby tě tví spolužáci mohli najít
- Najdi své přátele podle místa kde bydlíš nebo školy kterou studuješ
- Diskutuj ve skupinách o tématech, které tě zajímají
Studijní materiály
Hromadně přidat materiály
Protokol_10
AMOL - Úvod do molekulární biologie a genetiky
Hodnocení materiálu:
Zjednodušená ukázka:
Stáhnout celý tento materiáličky a vložíme hřebínek. Po zatuhnutí vložíme gel do elektroforetického aparátu, vyjmeme hřebínek a naneseme vzorky. Reakční směsi A-C jsou smíchány s 2,5 l 5x nanášecího pufru pro elektroforézu a naneseny na připravený gel. Zařízení přiklopíme a aplikujeme elektrické napětí 130 V po dobu 20-30 min. Poté gel vyjmeme (pracujeme v rukavicích), položíme do dokumentačního zařízení a vyfotografujeme.
Tabulka pro přípravu reakcí:
A
B
C
NEB pufr č. 4
1
1
1
10x roztok BSA
1
1
1
Plazmidová DNA (pDS1)
3
3
3
Voda pro molekulární biologii
4,5
4,5
4
Enzym Cla I
0,5
-
0,5
Enzym Spe I
-
0,5
0,5
Celkem
10 l
10 l
10 l
Mapa plazmidu pBC SK(+):
Izolovaná plazmidová DNA pDS1 byla štěpena restrikčním enzymem Cla I (C), Spe I (B) a oběma enzymy současně (A). Ze získaných fragmentů DNA odvoďte restrikční mapu klonované DNA a mapu konstruktu pDS1. Viditelné fragmenty DNA ve standardní dráze (S): 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8 a 10 kb.
Závěr (navržená mapa plazmidu):
Kontrolní Otázky:
Jak velký je klonovaný fragment DNA?
Jak velké fragmenty vzniknou po štěpení oběma enzymy současně a jaká restrikční místa mají na svých koncích?
Je možné z uvedených výsledků sestavit více alternativních restrikčních map?
Fragment o délce 2,6 kb je při štěpení oběma enzymy současně nepatrně kratší. Proč?
Praktické cvičení bylo provedeno dne:Podpis vyučujícího:
1 kb
2 kb
3 kb
Vloženo: 26.05.2011
Velikost: 64,50 kB
Komentáře
Tento materiál neobsahuje žádné komentáře.
Copyright 2025 unium.cz
