mikrobiologie-přednášky

íselný kód
vyhodnocuje počítač pomocí statistických metod
rRNA taxonomie
Identifikace bakterií
podmínka správné identifikace – čistá kultura!
morfologické vlastnosti:
tvar, velikost, seskupení buněk, pohyblivost, umístění bičíku, barvitelnost podle Grama, spóry,.........
kultivační vlastnosti:
tvar, pigmentace, okraje kolonií, růst v tekutém médiu
fyziologické vlastnosti:
vztah ke kyslíku, teplota, pH, tolerance k solím, žluči a jiným látkám
biochemická vlastnosti:
zdroje živin, enzymy, metabolity
molekulárně-biologické testy:
genetická informace mikroorganizmu
Rozdělení bakterií podle typu buněčné stěny
Grampozitivní bakterie
Gramnegativní bakterie
Mykobakterie ( proteiny, glykolipidy )
Spirochety ( lipoproteiny )
Mykoplazmata
4 hlavní kategorie bakterií
Gramnegativní eubakterie s buněčnou stěnou
Grampozitivní eubakterie s buněčnou stěnou
Eubakterie bez buněčné stěny
Archaeobakterie
Rozlišovací znaky eubakterií a archaeobakterií
Znak
Eubakterie
Archaeobakterie
Citlivost na penicilin
+-
-
Kys.muramová v buněčné stěně
+
-
Další rozdíly: - složení lipidů v cytoplazmatické membráně
- složení tRNA
- metabolismus
4 hlavní kategorie bakterií
Gramnegativní eubakterie s buněčnou stěnou
Obvykle se barví gramnegativně
Množí se dělením a pučením
Jsou fototrofní, litotrofní a heterotrofní
Grampozitivní eubakterie s buněčnou stěnou
Obvykle se barví grampozitivně
Množí se dělením, některé tvoří endospory
Jsou heterotrofní
Eubakterie bez buněčné stěny
Obecně uváděny jako mykoplazmata
Buňky jsou pleomorfní a mají proměnlivou velikost
Archaeobakterie
Hlavně půdní a vodní mikroorganismy
Některé se vyskytují v trávicím traktu živočichů
Nemají peptidoglyken v buněčné stěně
Jsou mezofilní nebo termofilní
5.přednáška
Růst a množení baktérií
Lagfáze
Bakterie se přizpůsobují prostředí
Syntéza enzymů
Buňky se nemnoží, může dojít k poklesu počtu
Exponenciální ( logaritmická ) fáze
Intenzivní množení
Nejkratší doba zdvojení
Rychlost dělení je konstantní
Za regenerační dobu se zdvojnásobí počet
Intenzivní spotřeba živin
Maximální produkce primárních metabolitů
Stacionální fáze
Počet živých buněk je konstantní
Počet umírajících = počtu vzniklých
Doba zdvojení = 0
Spotřebovávají se živiny
Hromadění metabolitů
Produkce sekundárních metabolitů
Fáze odumírání
Počet buněk se snižuje
Záporná doba zdvojení
Živiny spotřebovány
Nahromaděné metabolity
Parametry růstové křívky
Parametry exponenciální fáze: generační doba (T), specifická růstová rychlost (µ), rychlost dělění (R)
Ostatní: doba lagu (L), počet buněk (x), počet generací (n)
Množení bakterií v exponenciální fázi
generace
Počet bakterií
0
1
1
2
2
4
3
8
4
16
n
2n
Počet bakterií obecně: x = x0 . 2n
Počet bakterií obecně: x = x0 . 2n
Logx = logx0 + nlog2
Počet generací: n = (logx – logx0) / log2
Rychlost dělení: R = n/t = [(logx – logx0)/log2]/(t-t0)
Generační doba: T = 1/R = log2[(t-t0)/(logx – logx0)]
Generační doba = doba zdvojení
Je doba potřebná ke zdvojnásobení počtu buněk v kultuře
Je doba dělení buňky
Doba, za kterou dojde ke zdvojnásobení mikrobiální biomasy
Fyzikální rozměr: h
mikroorganismus
Generační doba (h)
Streptococcus thermophilus
0,20
Escherichia coli
0,35
Baccillus subtilis
0,43
Clostridium botulinum
0,58
Mycobacterium tuberculosis
12
Saccharomyces cerevisce
2
Prvoci
10
Specifická růstová rychlost: µ
Udává množství biomasy vytvořené jednotkou biomasy za jednotku času
Udává zlomek buňky vytvořené jednou buňkou za jednotku času
Fyzikální rozměr: h-1

Růstová křivka bakteriální populace (statická, jednorázová kultivace)
!!! Může být v testu !!!
Specifická růstová rychlost: µ
µ = ln2/T
µ = (lnx – lnx0)/(t – t0)
Metody měření růstu bakterií
Kultivační
Turbidimetrie
Konduktometrie
!!! Může být v testu !!!
Výsledek je: 1) 320
2) 10
!!! Může být v testu !!!
Výsledek je: 1,61hod. = 1hodina 37minut
Výsledek je: 0,43 h-1 Z počátečního 1g biomasy vznikne za 1hod. 0,43g biomasy.
Ovlivnění růstu bakterií (mikroorganismů)
Substrát (živiny)
Antimikrobiální látky (desinfekční l., ATB, bakteriociny)
Teplota (minimum, optimum, maximum)
Vliv teploty na růst mikroorganismů
Psychrotrofové, psychrofilové (