- Stahuj zápisky z přednášek a ostatní studijní materiály
- Zapisuj si jen kvalitní vyučující (obsáhlá databáze referencí)
- Nastav si své předměty a buď stále v obraze
- Zapoj se svojí aktivitou do soutěže o ceny
- Založ si svůj profil, aby tě tví spolužáci mohli najít
- Najdi své přátele podle místa kde bydlíš nebo školy kterou studuješ
- Diskutuj ve skupinách o tématech, které tě zajímají
Studijní materiály
Hromadně přidat materiály
Protokol_10
AMOL - Úvod do molekulární biologie a genetiky
Hodnocení materiálu:
Zjednodušená ukázka:
Stáhnout celý tento materiálJméno studenta:
Skupina:
Protokol č. 11
Restrikční mapování
Úloha 1:Konstrukce restrikční mapy plaZmidové DNA s použitím restrikčního štěpení a DNA elektroforézy
Úvod:
Plazmidová DNA je široce používána v molekulární genetice, zejména v upravené formě pro klonování a expresi rekombinantních genů (jako základ klonovacích vektorů). Každý klonovací vektor obsahuje nejméně tři základní oblasti: počátek replikace zajišťující replikaci plazmidu nezávislou na replikaci bakteriálního chromosomu, gen kódující rezistenci na některé antibiotikum a klonovací místo (MCS - multiple cloning site), které obsahuje několik cílových míst restrikčních enzymů, které se nevyskytují nikde jinde v sekvenci vektoru. Při znalosti restrikční mapy klonovacího vektoru můžeme při restrikční analýze odvodit restrikční mapu neznámé sekvence DNA. Konstrukce restrikčních map představuje jeden z prvních kroků při charakterizaci DNA o neznámé sekvenci. Praktické cvičení bude demonstrovat tyto metody práce s DNA.
Materiál:
Izolovaná plazmidová DNA (plazmid pDS1 = pBC SK(+) [Stratagene] s fragmentem DNA získaným po štěpení pColU [plazmidová DNA] enzymem Cla I a klonovaným do restrikčního místa Cla I), zkumavky Eppendorf pro restrikční štěpení, pipety a sterilní špičky, led, restrikční endonukleáza Cla I (Takara Biomedicals), Spe I (New England Biolabs - NEB), pufr
Vloženo: 26.05.2011
Velikost: 64,50 kB
Komentáře
Tento materiál neobsahuje žádné komentáře.
Copyright 2024 unium.cz