- Stahuj zápisky z přednášek a ostatní studijní materiály
- Zapisuj si jen kvalitní vyučující (obsáhlá databáze referencí)
- Nastav si své předměty a buď stále v obraze
- Zapoj se svojí aktivitou do soutěže o ceny
- Založ si svůj profil, aby tě tví spolužáci mohli najít
- Najdi své přátele podle místa kde bydlíš nebo školy kterou studuješ
- Diskutuj ve skupinách o tématech, které tě zajímají
Studijní materiály
Hromadně přidat materiály
Protokol_11
AMOL - Úvod do molekulární biologie a genetiky
Hodnocení materiálu:
Zjednodušená ukázka:
Stáhnout celý tento materiálJméno studenta:
Skupina:
Protokol č. 12
Analýza lidského genotypu
Úloha 1:Detekce standardních a mutantních alel v lidské genomové DNA pomocí PCR a restrikční analýzy
Úvod:
Methylentetrahydrofolátreduktáza (MTHFR) je enzym, který je zapojen v metabolismu homocysteinu (homocystein je aminokyselina, která je velmi příbuzná methioninu a cysteinu). Jediným známým zdrojem homocysteinu v organismu je metabolismus methioninu. Mutace v genu pro MTHFR vedou k defektu remethylace a ke zvýšení hladin plazmatického homocysteinu. Hyperhomocysteinémie zvyšuje riziko žilní trombózy a onemocnění koronárních arterií. Mutantní termolabilní varianta (MTHFR-T) má namísto C na pozici 677 T (C677 => T677). Výskyt této mutace v populaci je až 40 %. K patologickému zvýšení hladiny homocysteinu však dochází jen u některých jedinců s heterozygotní formou mutace a také ne u všech pacientů s homozygotní formou mutace. Jedinci homozygotní pro tuto mutovanou termolabilní variantu MTHFR-T mají zvýšené riziko poškození tepen aterosklerózou na pětinásobek a žilní trombózy na trojnásobek oproti jedincům s alelou normální. Hladina homocysteinu je však ovlivněna i mnoha dalšími vlivy, především nedostatkem kyseliny listové, vitamínu B12 a B6. Budeme zjišťovat genotyp v genu pro MTHFR v místě C677 ve vzorcích DNA izolovaných od pacientů.
Materiál:
Izolovaná lidská DNA (z leukocytů periferní krve) z několika zdravých a několika nemocných jedinců (vzorky A-D), dvojice primerů: Mthfr1: 5´- TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA - 3´ a Mthfr2: 5´- AGGACGGTGCGGTGAGAGTG - 3´, PCR termocykler, zkumavky pro PCR amplifikaci, pipety, Taq DNA polymeráza, 10x pufr pro PCR reakci, roztok s deoxyribonukleotidy (
Vloženo: 26.05.2011
Velikost: 52,50 kB
Komentáře
Tento materiál neobsahuje žádné komentáře.
Copyright 2024 unium.cz